發布時間：所屬分類：醫學論文瀏覽：1次
摘 要： 摘 要：目的：探討分析應用酶聯免疫法與膠體金法檢測乙肝表面抗原的優缺點。方法：選取來自湖北某單采血漿站的 76 份抗 -HBV 陽性血清作為研究對象，分別采用酶聯免疫法和膠體金法對這些標本進行乙肝表面抗原檢測并分析。結果：經膠體金法檢測結果及酶聯免疫
摘 要：目的：探討分析應用酶聯免疫法與膠體金法檢測乙肝表面抗原的優缺點。方法：選取來自湖北某單采血漿站的 76 份抗 -HBV 陽性血清作為研究對象，分別采用酶聯免疫法和膠體金法對這些標本進行乙肝表面抗原檢測并分析。結果：經膠體金法檢測結果及酶聯免疫法檢測結果同時為陽性的標本有 26 份。膠體金法檢測結果為陽性，而酶聯免疫法檢測結果為陰性的標本有 2 份;膠體金法檢測結果為陰性，而酶聯免疫法檢測結果為陽性的標本有 3 份;膠體金法檢測結果及酶聯免疫法檢測結果同時為陰性的標本有 45 份。經統計學分析，應用膠體金法進行乙肝表面抗原檢測的假陰性率為 3.95%，假陽性率為 2.63%。應用酶聯免疫法進行乙肝表面抗原檢測的敏感性明顯高于應用膠體金法進行乙肝表面抗原檢測的敏感性，差異顯著(P < 0.05)。結論：酶聯免疫法與膠體金法均是檢測乙肝表面抗原的比較可靠的方法。膠體金檢測法適合于大規模的乙肝病毒快速篩檢，酶聯免疫檢測法則適合于對少數膠體金法檢測結果呈陽性的患者進行再次篩檢，進而大幅度提升檢測的準確率。
關鍵詞：酶聯免疫法;膠體金法;乙肝表面抗原檢測
在我國，HBV( 乙型肝炎病毒 ) 的高度流行地區，乙型肝炎病毒的感染率為 60% ～ 70%。全國約有 9 300 萬人攜帶乙型肝炎病毒，其中約 3 000 萬人是乙型肝炎患者，60% 的肝炎患者是慢性肝炎患者 [1]。 HBV 與肝硬化和原發性肝癌密切相關。HBV 的預防和治療是我國傳染病控制的首要問題，尚無明確有效的治療方法。此外，隨著人們生活水平的提高和健康意識的增強，檢測出兩對半的乙型肝炎已成為人們日常體檢，獻血者體檢，醫院急診患者和外科手術的常規檢查項目。目前實驗室普遍采用的酶聯免疫法檢測，雖然其性能得到公認，但需要相應設備，檢測時間長，操作較繁瑣，不便單樣本快速檢測。但膠體金快速檢測板不需要相應設備也能夠快速檢測單個樣本，非常便捷，適于快速初步檢測 [2]。
HBV 屬于嗜肝病毒科的 DNA 病毒，其大小形狀是直徑為 42nm 的球形顆粒。乙型肝炎病毒具有非常高的感染能力 [4-5]。在我國境內，乙型肝炎病毒的感染率已接近 5 成，主要的感染途徑包括母嬰傳播、血液感染、醫源性感染、性行為以及日常生活中的體液等等途徑都是極易造成感染的。傳染性病原體不僅對人體功能造成嚴重危害，HBV 還會引起嚴重的肝病，如 HBV 感染引起的肝硬化和肝癌。因此，必須高度重視乙型肝炎的防治。為提高乙型肝炎防治工作的針對性和有效性，必須進行準確有效的乙型肝炎病毒檢測。一旦乙型肝炎病毒進入人體，經過一系列的變化，乙型肝炎病毒基因(HBV-DNA)通過肝細胞的細胞質進入細胞核。此時，乙型肝炎病毒基因的雙鏈結構的一部分變為閉環結構，并且基于該模板轉錄，成為 mRNA，最后翻譯成乙型肝炎表面抗原。HBsAg 主要反映乙型肝炎病毒的活性和患者的乙型肝炎狀況。日前，最常用的乙型肝炎表面抗原檢測方法包括有：酶聯免疫法、膠體金法等 [6]。
酶聯免疫法(ELISA)，也稱為固相酶聯免疫吸附測定法，使用化學反應將測試對象與酶連接，然后使用免疫反應將抗原結合在測試對象和固相載體，最后添加基板進行顯色。通過顏色的深度判斷抗體的水平，酶聯免疫法(ELISA)廣泛用于乙型肝炎病毒的檢測。它主要起定性檢測作用，具有以下優點：靈敏度高、特異性強、檢測成本低、無污染。但是，這種檢測方法也存在一定的缺陷：實驗操作步驟復雜、操作時間長;根據相關的實驗證明，酶聯免疫法在乙型肝炎抗體的檢測中存在一定的缺陷，即發生假陽性檢測結果 [7]。
1 資料與方法
1.1 樣本來源
選取來自湖北某單采血漿站的 76 份抗 -HBV 陽性血清，年齡在 18 ～ 49 歲，其平均年齡在(28.3±15.6)歲，男性樣本 43 份，女性樣本 33 份。
1.2 檢測方法
血樣本為靜脈血，每份 5 mL。及時分離血清，分別用酶聯免疫法和膠體金法進行測定。酶聯免疫法診斷試劑盒(由北京萬泰生物藥業有限公司提供)、膠體金法診斷試劑盒(由英科新創廈門科技有限公司提供)[3]。嚴格按照試劑說明書操作。
1.3 統計學處理
數據采用 SPSS 22.0 統計軟件進行分析處理。符合正態分布的測量數據表示為平均值 ± 標準偏差(X — ±s);計數數據用示例(百分比)表示，并使用 χ 2 測試。差異有統計學意義，P < 0.05。
2 結果與分析
酶聯免疫法陽性 26 份，膠體金法陽性 26 份。2 種測試方法陽性均為 26 份，占比為 34.21%，均為陰性的有 45 份，占比為 59.21%，2 種測試方法的一致率非常高，其占比為 93.42%。酶聯免疫法的假陰性有 3 份，占比為 3.95%，假陽性有 2 份，其占比為 2.63%，與膠體金法測試的不符合率為 6.58%。詳情如表 1 所示。
相關期刊推薦：《生物化工》(雙月刊)創刊于2015年，期刊是國家期刊主管部門批準創辦、國內外公開發行的自然科學學術期刊，由江西省科學院主管主辦，國內統一刊號：CN36-1336/TQo讀者對象從事生物化工研發的高校師生、科研人員、廠礦企業技術人員、管理人員等。主要報道生物工程與化學領域發展動向和研究成果，重點關注生物材料與化工產業化相結合的最新成果，突出綠色能源化工技術和資源環境保護特色，搭建學術交流平臺，促進產學研一體化。
3 討論
綜上所述，酶聯免疫法與膠體金法均是檢測乙肝表面抗原的比較可靠的方法。然而，膠體金檢測法對檢測設備的要求較低，對單個樣體測試結果迅速，但是偶有假陽性結果出現，所以膠體金檢測法適合于大規模的乙肝病毒快速篩檢;酶聯免疫檢測法對檢測設備要求高，測試結果準確，可以有效避免假陽性結果，所以，酶聯免疫檢測法則適合于對少數膠體金法檢測結果呈陽性的患者進行再次篩檢，進而大幅度提升檢測的準確率。