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摘 要: 隨著醫(yī)療技術水平的不斷進步,臨床檢驗中引入了越來越多的高新技術,質(zhì)譜技術就是其中之一,其主要是一種對蛋白質(zhì)進行分析的較為強大的工具,其存在高通量、快速準確、自動化、操作簡便等優(yōu)點,所以在臨床的微生物檢驗中應用較為廣泛,在鑒定病原體方面具有
隨著醫(yī)療技術水平的不斷進步,臨床檢驗中引入了越來越多的高新技術,質(zhì)譜技術就是其中之一,其主要是一種對蛋白質(zhì)進行分析的較為強大的工具,其存在高通量、快速準確、自動化、操作簡便等優(yōu)點,所以在臨床的微生物檢驗中應用較為廣泛,在鑒定病原體方面具有顯著效果。這一技術從出現(xiàn)到發(fā)展對傳統(tǒng)檢驗模式進行了挑戰(zhàn),令檢驗的實效性和靈敏度得以提升。因此,為幫助病人們進行了解,下面就來介紹一下質(zhì)譜技術在臨床微生物檢測中的主要應用。
一、質(zhì)譜技術的原理和優(yōu)點
質(zhì)譜技術的主要工作原理是把基質(zhì)和樣品進行混合,而后將其點在相應的金屬靶盤上,構成一個共結晶,而后將激光當做能量的來源對結晶體進行輻射,此時基質(zhì)分子會對能量進行吸收,令樣品開始吸附,而后發(fā)生電離反應,形成質(zhì)荷比不同的帶電離子。而樣品離子處于加速的電場下,可以產(chǎn)生相同的動能,而后經(jīng)過高壓的加速和聚焦,進入到飛行時間的質(zhì)譜分析器中,完成質(zhì)量分析的操作。其中,飛行時間的平方和離子質(zhì)荷比呈現(xiàn)正相關的關系,通過計算機的處理,可以形成質(zhì)量圖譜,經(jīng)過相關的軟件進行分析和比較,可以篩選以及確定特異性的圖譜,進而鑒定或者區(qū)分菌株以及微生物。
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現(xiàn)今的臨床微生物實驗中,在鑒定細菌方面大都依靠傳統(tǒng)生化反應以及形態(tài)學技術等,在鑒定細菌方面也需首先進分離純化,就算利用相關的自動化鑒定儀,也需保證時效性的要求,特別是在檢測菌血癥這類重癥感染的過程中。而質(zhì)譜技術一般不要求樣品純度,所以樣品檢測過程中可以不進分離和純化,可以進行直接的點樣。該方式的操作較為簡便,還可不斷擴展數(shù)據(jù)庫,所以可準確且快速地完成檢測,還可保證高通量。
二、質(zhì)譜技術在臨床微生物檢測中的應用
就現(xiàn)今的情況來看,質(zhì)譜技術現(xiàn)已被廣泛應用于臨床微生物檢測中,主要檢測的菌種包括霉菌、酵母菌、分枝桿菌、厭氧菌、需氧菌、革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌等。
1、鑒定及分析細菌
質(zhì)譜技術可對多種細菌進行充分分析,其中,檢測的樣本既可為進分離培養(yǎng)的一些純菌落,同樣也可為原始的臨床樣本,其可以被直接用來檢測。質(zhì)譜技術在鑒定臨床常見菌方面存在較高的準確性,所以其在臨床的微生物檢驗中備受青睞。
其一是在鑒定革蘭氏陰性菌方面具有顯著效果。鑒定革蘭氏陰性菌,比如常見的腸桿菌科細菌以及非發(fā)酵菌,存在較高的準確率。經(jīng)過研究實驗表明,利用質(zhì)譜技術鑒定革蘭氏陰性菌具有較為明顯的效果,經(jīng)過對比后也可以發(fā)現(xiàn),質(zhì)譜技術還能將革蘭氏陰性菌快速鑒定出來。
其二是在鑒定革蘭氏陽性菌方面,也有一定的效果。經(jīng)過研究調(diào)查發(fā)現(xiàn),利用質(zhì)譜技術鑒定和分析兩千多株細菌,其中有536株革蘭氏陽性菌、鏈球菌28株、葡萄球菌357株、腸球菌81株、還有其他的革蘭氏陽性菌29株,經(jīng)過鑒定發(fā)現(xiàn),質(zhì)譜技術對腸球菌和葡萄球菌的鑒定成功率達到了100%,而在鑒定鏈球菌方面還存在一定的弊端,鑒定到種的只有63株,準確的概率約為92.6%,但對緩癥鏈球菌及肺炎鏈球菌的鑒定則存在更大的缺陷。
其三是鑒定和分析厭氧菌。因在分析厭氧菌的過程中,對鑒定的要求以及培養(yǎng)的要求相對較高,所以伴隨臨床重視厭氧菌感染的程度越來越高,培養(yǎng)厭氧菌的要求也開始隨之升高。利用傳統(tǒng)的生化鑒定技術,耗費的時間較長,而且很容易受到外界因素的不良影響,因此無法保證準確的鑒定結果,進而無法滿足鑒定分許所需的實效性要求。而經(jīng)過研究調(diào)查發(fā)現(xiàn),利用質(zhì)譜技術鑒定厭氧菌,鑒定結果的準確率可達到94.82%,其與其他的鑒定技術相比,也存在較為明顯的優(yōu)勢,對臨床感染性疾病的診斷和治療具有較為有利的推動作用。
其四是鑒定和分析結合分枝桿菌。同樣經(jīng)過研究調(diào)查發(fā)現(xiàn),在鑒定分枝桿菌方面,質(zhì)譜技術的診斷正確率較高,可達91%左右,所以可被臨床推廣應用。
2、鑒定和分析真菌
近年來,臨床上出現(xiàn)了許多侵襲性的真菌感染病癥,特別是現(xiàn)今正處于人口老齡化日益加劇的時期,臨床上過多的使用侵入性的治療,導致很多病人出現(xiàn)免疫缺陷,進而引發(fā)較高的疾病發(fā)病率及死亡率。傳統(tǒng)的鑒定培養(yǎng)真菌的手段相對來說耗費的時間過長,同時還需專業(yè)知識較高且工作經(jīng)驗較為豐富的工作人員進行操作,特別是在鑒定一些常見的菌株時,常常需要耗費諸多人力物力,所以臨床上需要快速鑒定真菌的方式來緩解醫(yī)療難題。經(jīng)過調(diào)查發(fā)現(xiàn),利用質(zhì)譜技術進行真菌的分析及鑒定,具有較高的準確率,且存在較為明顯的速度優(yōu)勢。
而在鑒定絲狀真菌方面,質(zhì)譜技術的準確程度同樣可觀,這對于臨床上微生物檢測也是一項重要突破,對于一些因常見的絲狀真菌所引發(fā)的疾病來說,該技術也發(fā)揮了重要的診斷預防作用,對病人和醫(yī)療界而言,都具有推動作用。
綜上所述,我國的科學技術水平在不斷發(fā)展進步,質(zhì)譜技術作為現(xiàn)今臨床微生物檢測中常見的檢測方式之一,其具有較為顯著的優(yōu)越性,并以這種優(yōu)越性檢測出了多種臨床微生物,對病人疾病的治療起到了關鍵性的作用,同時也推動了醫(yī)療水平的進一步上升。本文據(jù)此介紹了質(zhì)譜技術在臨床上的應用,以便病人及其家屬存在相關認知。——論文作者:何林林